S-X3凝膠色譜法的原理比較特殊類似于分子篩。
待分離組分在進(jìn)入S-X3凝膠色譜法后,會(huì)依據(jù)分子量的不同,進(jìn)入或者不進(jìn)入固定相凝膠的孔隙中,不能進(jìn)入凝膠孔隙的分子會(huì)很快隨流動(dòng)相洗脫,而能夠進(jìn)入凝膠孔隙的分子則需要更長(zhǎng)時(shí)間的沖洗才能夠流出固定相,從而實(shí)現(xiàn)了根據(jù)分子量差異對(duì)各組分的分離。
S-X3凝膠色譜法的優(yōu)缺點(diǎn)
S-X3凝膠色譜法的優(yōu)點(diǎn):
①一次實(shí)驗(yàn)所需時(shí)間可以預(yù)先知道,因?yàn)椴粫?huì)超過(guò)整個(gè)色譜柱中全部溶劑流出色譜柱所需時(shí)間;
②整個(gè)淋洗均用單一淋洗劑,不使用梯度淋洗;
③試樣在柱中稀釋少,因而容易檢測(cè);
④只要試樣能溶解就能測(cè)定,減少了用于試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)條件的時(shí)間;
⑤組分的保留時(shí)間提供它們的分子尺寸信息。
S-X3凝膠色譜法的缺點(diǎn):
①要得到分離效果,試樣間必須有分子尺寸的差別。分子尺寸相同的混合物(如異構(gòu)體的混合物)不易分開;
②色譜柱的分離度比其他類型的低;
③峰容量小,一組具有20000理論塔片的凝膠色譜柱,按峰容量=1+0.2(理論塔片數(shù))[sb-2fz1] 來(lái)估計(jì),在擴(kuò)散系數(shù)相同時(shí),理論峰容量為 30,而其他類型液相色譜法中,這個(gè)值要大得多;
④可能有其他保留機(jī)理起作用,引起干擾,例如,填料表面殘留活性基團(tuán)引起對(duì)溶質(zhì)的吸附。