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凝膠制備液相色譜儀在生化方面的應用
更新時間:2019-07-27 點擊次數:1518
凝膠制備液相色譜儀在生化方面的應用:
主要方向是分析嘌呤、嘧啶基的核甙或核甙酸及具有相應的肽和蛋白質。
①在細胞核中有種類繁多的甙及核甙酸,可用不同的檢測器或酶轉移檢測器或利用酶反應進行定性測定。用離子交換柱和緩沖游泳梯度淋洗。用含磷酸的緩沖水溶液的梯度淋洗法均能得到滿意的結果。
②分析核酸近年來有關分析核酸的研究很多,主要是分離RNA、DNA及碎片。現在使用硅烷化的硅藻土或長碳鏈季胺鹽涂漬=在上面制成系列填充柱。已能分離t-RNA,r-RNA及DNV碎片。有沒的緩沖液淋洗,還可利用此技術做RNA碎片的序列分離制備工具,對生物研究起了重要的作用。
③氨基酸、肽、蛋白質的分析,氨基酸分析主要是制成熒光衍生物或酰氯的衍生物,然后測定其序列。近來也可用凝膠制備液相色譜儀的柱后衍生物法測定其序列。操作簡便、速度快、深受歡迎。用四烷基氯化胺肽形成離子對測定蛋白質,其分離效果也很好。
④酶的分析,酶是在血清及其他生理樣品中常有的反應產物,化學分析法操作不便,易造成誤差,用色譜技術分析,具有操作簡便、快速、準確的特點。如測定堿性或酸性磷酸酶的含量,測定反應產物中腺甙脫 胺酶的含量等,目前對酶用色譜法分離分析的研究工作已開展很多。
⑤糖的分析,糖的分析是其它方法較難完成的。如把糖與硼酸緩沖液預選混合,使生成糖-硼酸絡合離子,再進行分離。可把蔗乳糖、阿蘆糖、果糖、阿拉伯糖、巖藻糖、半乳糖、山梨糖、木糖、葡萄糖等幾十種,全部分開。也可用胺基柱分離各種天然產物中伯糖的各繃分。