原理

使用液相色譜法分析電離能力比較強的樣品時，樣品在反相色譜柱上的保留時間很短或者根本不保留，這時要加入相應的離子對試劑，將分析物上的離子進行結合，形成在柱子上有保留的分子。

離子對試劑種類

離子對試劑的種類和濃度對分離效果都有較大的影響。離子對試劑種類的選擇依賴于被分離樣品的性質。

● 被分離溶質是強酸或強堿，離子對試劑可以是強酸或強堿，弱堿或弱酸。

● 被分離的溶質是弱酸或弱堿，則選用的離子對試劑必須是強堿或強酸。

● 對于溶質結構性質相差較大的混合樣品，離子對試劑種類的選擇并沒有特殊要求。

● 離子對試劑疏水性的差別可以通過調節離子對試劑濃度和有機溶劑濃度獲得滿意的分離效果。

1. 用于酸性化合物：四丁基氫氧化銨（10%水溶液） 、四丁基溴化銨、十二烷基三甲基氯化銨。

2. 用于堿性化合物：戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉 、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、癸烷磺酸鈉。

3. 其他離子對試劑：高氯酸鈉、三氟yi酸、七氟丁酸等。

常用離子對試劑 CAS號：

1-戊烷磺酸鈉 CAS:22767-49-3

1-己烷磺酸鈉 CAS:2832-45-3

1-庚烷磺酸鈉 CAS:22767-50-6

1-辛烷磺酸鈉 CAS:5324-84-5

1-癸烷磺酸鈉 CAS:13419-61-9

離子對試劑選用步驟

1．選擇一根適合的色譜柱，常為C18柱。

2．準備流動相時僅使用HPLC級別的水和色譜級試劑。

3．選擇能給出最佳分離度的流動相成分和濃度。

4．如果樣品中有非離子化物質，在嘗試離子化分離之前首先優化分離情況。

5．選擇合適的離子對系列試劑以提供相應的離子配對：對于酸性分析物使用酸性離子對試劑；對于堿性分析物使用堿性離子對試劑。

6．通過比較選擇所得分離度zui 好的離子對試劑。

7．一旦離子對試劑已經確定，調節流動相的pH值將分離度zui大化；因為微小的pH值改變對保留性質和選擇性都有較大的影響，所以仔細的小幅度調節pH值。

8．理想狀況下，流動相中的離子對試劑濃度應為0.005M，但是稍微增加離子對試劑可能會稍微增加保留性質并因此優化分離情況。