糖檢測色譜柱由聚苯乙烯二乙烯苯樹脂填裝而成的,具有良好的高壓及pH穩定性、高柱效和選擇性。通過離子調節分配層析技術分離混合物,這種技術是根據多種不同的化學特性分離分子。離子調節分配層析技術的分離機制包括離子排阻、離子交換、正相和反相分配、分子量排阻和配體交換。
根據層析的物理和化學特性,可選擇使用一個或多個分離機制。是工業界普遍使用的,用來分析碳水化合物、有機酸、有機堿和其它包括肽和核酸的有機小分子的標準產品。用色譜柱分離復雜混合物需要使用簡單等流相(常用水),并要求精確控溫。
糖檢測色譜柱的特點:
特別適用于糖類的親水性相互作用色譜分析;
采用聚合物基質填料,色譜柱化學穩定性好,壽命長,分離效果隨時間變化小;
能用堿性溶液清洗;
適用于蒸發光散射檢測器、電霧化檢測器以及LC/MS。
糖檢測色譜柱的裝柱方法:
1、根據分離目標性質配制初始緩沖液和洗脫緩沖液。
2、將所取凝膠抽干,用初始緩沖液配成勻漿并脫氣。
3、將層析柱垂直固定,底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。
4、用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,使凝膠在柱內自由沉降,水封層析柱,沉降過夜。
5、連結好柱子頂端活動柱頭,打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時操作流速流過5柱體積,再使用操作流速流過5柱體積,調節適配柱頭,使其盡量貼近膠面,用柱體積的緩沖液平衡柱子。
注意:所有操作過程不能引入氣泡,保證裝膠的均勻度。