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凝膠過濾色譜中的瓊脂糖凝膠
更新時間:2022-01-20 點擊次數:2519
基于凝膠過濾色譜的原理,對其介質的最基本的要求是不能與原料組分發生除排阻之外的任何其他相互作用,如電荷作用、化學作用、生物學作用等。理想的凝膠過濾介質具有高物理強度及化學穩定性,能夠耐受高溫高壓和強酸強堿,具有高化學惰性,內孔徑分布范圍窄,珠粒狀顆粒大小均一度高。目前常用的有葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等。
瓊脂糖凝膠來源于一種海藻多糖瓊脂,是一種天然凝膠,不是共價交聯,所以氫鍵交聯的鍵能比較弱。它與葡聚糖不同,孔隙度是以改變瓊脂糖濃度而達到的。瓊脂糖凝膠的化學穩定性不如葡聚糖凝膠。瓊脂糖凝膠沒有干膠,必須在溶脹狀態保存,除丙酮和乙醇外,瓊脂糖凝膠遇脫水劑、冷凍劑和一些有機溶劑即被破壞。用瓊脂糖凝膠進行分離操作的適宜工作條件是pH4.5-9、溫度0-40℃。瓊脂糖凝膠對硼酸鹽有吸附作用,不能用硼酸緩沖液。
瓊脂糖凝膠顆粒的強度很低,操作時必須十分小心。另外,由于瓊脂糖顆粒彈性小,柱高引起的壓力能導致變形,造成流速降低甚至堵塞,所以裝柱時應設法對柱壓進行調整。瓊脂糖凝膠沒有帶電基團,所以對蛋白類物質的非特異性吸附力明顯小于葡聚糖凝膠。在介質離子濃度>0.1mol/L時已不存在明顯吸附。
瓊脂糖凝膠的特征是能分離幾萬至幾千萬高分子量的物質,分離范圍隨著凝膠濃度上升而下降,顆粒強度卻隨濃度上升而提高,特別適用于核酸類、多糖類和蛋白類物質的分離,彌補了聚丙烯酰胺凝膠和葡聚糖凝膠的不足,擴大了應用范圍。
月旭科技瓊脂糖凝膠的名稱為Tanrose,以下介紹一下Tanrose Fast Flow系列產品。
Tanrose 4FF和Tanrose 6FF分別為4%和6%的瓊脂糖經過乳化、漂洗、分篩而成的凝膠過濾介質,該介質具有良好的物理和化學穩定性,該介質既可采用氫氧化鈉滅菌,也可以高壓蒸汽滅菌。用于多糖、核酸、病毒、超螺旋DNA及大分子復合物的分離純化或者檢測。